Servicios científicos
Microscopía electrónica
El servicio de microscopía electrónica ofrece apoyo científico y técnico a los grupos de investigación, tanto internos como externos al CBM, interesados en utilizar la microscopía electrónica de transmisión para el análisis ultraestructural e inmunocitoquímico de muestras biológicas.
Podemos estudiar complejos macromoleculares, virus, bacterias, células eucariotas y tejidos. Los métodos disponibles incluyen técnicas convencionales de procesamiento a temperatura ambiente y criotécnicas como la criosustitución, la crioultramicrotomía y la criofractura.
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· Microscopio electrónico de transmisión JEM1010 (Jeol,1992)
– Cañón de emisión termoiónica: filamento de tungsteno
– Voltaje de aceleración hasta 100 kV.
– Cámara digital bajo columna CMOS TemCam F416 (TVIPS)
· Microscopio electrónico de transmisión JEM1400 Flash (Jeol, 2017)
– Cañón de emisión termoiónica: filamento de LaB6.
– Voltaje de aceleración hasta 120 kV.
– Cámara digital bajo columna CMOS de lectura rápida OneView (Gatan).
Microscopios electrónicos de transmisión
· Microscopio electrónico de transmisión JEM1010 (Jeol,1992)
– Cañón de emisión termoiónica: filamento de tungsteno
– Voltaje de aceleración hasta 100 kV.
– Cámara digital bajo columna CMOS TemCam F416 (TVIPS)
· Microscopio electrónico de transmisión JEM1400 Flash (Jeol, 2017)
– Cañón de emisión termoiónica: filamento de LaB6.
– Voltaje de aceleración hasta 120 kV.
– Cámara digital bajo columna CMOS de lectura rápida OneView (Gatan).
Equipos de procesamiento de muestras en frío
· Criofijación por inmersión en líquido criogénico ( “plunge freezing” ), equipo KF80 (Reichert-Jung, Leica,1992)
– Vitrificación en etano líquido, de muestras particuladas (macromoléculas, virus…) adsorbidas a rejillas.
– Congelación ultrarápida de células o tejidos fijados químicamente y crioprotegidos para su procesamiento por criosustitución.
Criofijación por alta presión (HPF), equipo LEICA EM ICE (2023).
– Vitrificación de células, tejidos y pequeños organismos en condiciones nativas para su procesamiento por criosustitución o criofractura.
Criosustitución automática, equipo LEICA EM AFS2 (2023).
– Deshidratación a bajas temperaturas, -90 ºC, -80 ºC (criosustitución), crioinclusión en resinas Lowicryl y polimerización con luz UV a bajas temperaturas.
– Criosustitución previa a la inclusión en resina Epoxi a temperatura ambiente para análisis morfológicos
Ultramicrotomos
· Ultramicrotomo ULTRACUT E (Reichert-Jung, Leica).
– Obtención de cortes semifinos, 1mm, y ultrafinos, 60nm – 90nm a temperatura ambiente de muestras incluidas en resinas.
· Ultramicrotomo con criocámara, UCT (Leica).
– Obtención de cortes semifinos, 1mm, y ultrafinos, 60nm – 90nm a temperatura ambiente de muestras incluidas en resinas.
– Obtención de criosecciones a baja temperatura , – 80 ºC a -120ºC para inmunomarcaje, técnica de Tokuyasu.
· Ultramicrotomo con criocámara y posibilidad de deteción de fluorescencia. Enuity (Leica).
– Obtención de cortes semifinos, 1mm, y ultrafinos, 60nm – 90nm a temperatura ambiente de muestras incluidas en resinas.
– Obtención de criosecciones a baja temperatura , – 80 ºC a -120ºC para inmunomarcaje, técnica de Tokuyasu.
– RT ionisador para mejorar cortas seriados.
– Dispositivo de carga a temperatura ambiente para mejorar el seccionamiento en serie.
Evaporador Leica EM AC600 (2023)
– Recubrimiento de rejillas con carbón evaporado.
– Ionización de rejillas mediante “Glow discharge”
Técnicas
– Tinción negativa de complejos macromoleculares y virus.
– Análisis de nanopartículas.
– Inclusión convencional de muestras biológicas en resinas y ultramicrotomía.
– Criofijación mediante inmersión en etano líquido y por alta presión.
– Criosustitución e inclusión a baja temperatura.
– Inmunomicroscopía electrónica con conjugados a oro coloidal en cortes de resina.
– Inmunomicroscopía electrónica con conjugados de oro coloidal en cortes de resina.
– Microscopía óptica y electrónica correlativa (CLEM).
Personal

Milagros Guerra Rodríguez
Technician in Scientific Facility
Lab.: 113 Ext.: 4532
mguerra(at)cbm.csic.es

Tania Matamoros Grande
Technician in Scientific Facility
Lab.: 113 Ext.: 4532
tmatamoros(at)cbm.csic.es

Raquel Losada de Paz
Technician in Scientific Facility
Lab.: 113 Ext.: 4532
rlosada(at)cbm.csic.es

Martin Christoph Sachse
Head of Scientific Facility
Lab.: 113 Ext.: 4538/4532
martin.sachse(at)cbm.csic.es













