Servicios científicos

Microscopía electrónica

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Responsable del servicio

Martin Christoph Sachse

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Contacto

91 196 45 32

sme (at) cbm.csic.es

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Tarifas

El servicio de microscopía electrónica ofrece apoyo científico y técnico a los grupos de investigación, tanto internos como externos al CBM, interesados en utilizar la microscopía electrónica de transmisión para el análisis ultraestructural e inmunocitoquímico de muestras biológicas.

Podemos estudiar complejos macromoleculares, virus, bacterias, células eucariotas y tejidos. Los métodos disponibles incluyen técnicas convencionales de procesamiento a temperatura ambiente y criotécnicas como la criosustitución, la crioultramicrotomía y la criofractura.

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· Microscopio electrónico de transmisión JEM1010 (Jeol,1992)
– Cañón de emisión termoiónica: filamento de tungsteno
– Voltaje de aceleración hasta 100 kV.
– Cámara digital bajo columna CMOS TemCam F416 (TVIPS)


· Microscopio electrónico de transmisión JEM1400 Flash (Jeol, 2017)
– Cañón de emisión termoiónica: filamento de LaB6.
– Voltaje de aceleración hasta 120 kV.
– Cámara digital bajo columna CMOS de lectura rápida OneView (Gatan).

Microscopios electrónicos de transmisión

· Microscopio electrónico de transmisión JEM1010 (Jeol,1992)
– Cañón de emisión termoiónica: filamento de tungsteno
– Voltaje de aceleración hasta 100 kV.
– Cámara digital bajo columna CMOS TemCam F416 (TVIPS)

· Microscopio electrónico de transmisión JEM1400 Flash (Jeol, 2017)
– Cañón de emisión termoiónica: filamento de LaB6.
– Voltaje de aceleración hasta 120 kV.
– Cámara digital bajo columna CMOS de lectura rápida OneView (Gatan).

Equipos de procesamiento de muestras en frío

· Criofijación por inmersión en líquido criogénico ( “plunge freezing” ), equipo KF80 (Reichert-Jung, Leica,1992)
– Vitrificación en etano líquido, de muestras particuladas (macromoléculas, virus…) adsorbidas a rejillas.
– Congelación ultrarápida de células o tejidos fijados químicamente y crioprotegidos para su procesamiento por criosustitución.

Criofijación por alta presión (HPF), equipo LEICA EM ICE (2023).

– Vitrificación de células, tejidos y pequeños organismos en condiciones nativas para su procesamiento por criosustitución o criofractura.

Criosustitución automática, equipo LEICA EM AFS2 (2023).
– Deshidratación a bajas temperaturas, -90 ºC, -80 ºC (criosustitución), crioinclusión en resinas Lowicryl y polimerización con luz UV a bajas temperaturas.
– Criosustitución previa a la inclusión en resina Epoxi a temperatura ambiente para análisis morfológicos

 

 

Ultramicrotomos

· Ultramicrotomo ULTRACUT E (Reichert-Jung, Leica).
– Obtención de cortes semifinos, 1mm, y ultrafinos, 60nm – 90nm a temperatura ambiente de muestras incluidas en resinas.


· Ultramicrotomo con criocámara, UCT (Leica).
– Obtención de cortes semifinos, 1mm, y ultrafinos, 60nm – 90nm a temperatura ambiente de muestras incluidas en resinas.
– Obtención de criosecciones a baja temperatura , – 80 ºC a -120ºC para inmunomarcaje, técnica de Tokuyasu.

 

· Ultramicrotomo con criocámara y posibilidad de deteción de fluorescencia. Enuity (Leica).
– Obtención de cortes semifinos, 1mm, y ultrafinos, 60nm – 90nm a temperatura ambiente de muestras incluidas en resinas.
– Obtención de criosecciones a baja temperatura , – 80 ºC a -120ºC para inmunomarcaje, técnica de Tokuyasu.
– RT ionisador para mejorar cortas seriados.

– Dispositivo de carga a temperatura ambiente para mejorar el seccionamiento en serie.

Evaporador Leica EM AC600 (2023)


– Recubrimiento de rejillas con carbón evaporado.
– Ionización de rejillas mediante “Glow discharge”

Técnicas

– Tinción negativa de complejos macromoleculares y virus.


– Análisis de nanopartículas.
– Inclusión convencional de muestras biológicas en resinas y ultramicrotomía.


– Criofijación mediante inmersión en etano líquido y por alta presión.
– Criosustitución e inclusión a baja temperatura.


– Inmunomicroscopía electrónica con conjugados a oro coloidal en cortes de resina.
– Inmunomicroscopía electrónica con conjugados de oro coloidal en cortes de resina.


– Microscopía óptica y electrónica correlativa (CLEM).

Personal

Milagros Guerra Rodríguez

Technician in Scientific Facility
Lab.: 113 Ext.: 4532
mguerra(at)cbm.csic.es

Tania Matamoros Grande

Technician in Scientific Facility
Lab.: 113 Ext.: 4532
tmatamoros(at)cbm.csic.es

Raquel Losada de Paz

Technician in Scientific Facility
Lab.: 113 Ext.: 4532
rlosada(at)cbm.csic.es

Martin Christoph Sachse

Head of Scientific Facility
Lab.: 113 Ext.: 4538/4532
martin.sachse(at)cbm.csic.es