Servicios científicos

Edición genética de ratón

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Responsable del servicio

Belén Pintado

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Contacto

91 585 48 38

transgenesis (at) cbm.csic.es

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Tarifas

La instalación de edición genética de ratones es compartida entre el CBM y el CNB (Centro Nacional de Biotecnología), y nuestra misión es proporcionar a los usuarios los modelos de ratones genéticamente alterados que necesitan para sus estudios.

La instalación da soporte a usuarios internos y externos del CSIC para el diseño y generación de nuevos modelos animales mediante diferentes tecnologías y asesora en diferentes aspectos de la gestión de colonias.

La instalación también diseña guías y edita líneas celulares por electroporación.

Entre nuestros servicios se incluyen los siguientes:

Transgénesis aditiva

Modelos de sobreexpresión obtenidos por microinyección pronuclear de transgenes proporcionados por los usuarios solicitantes. El servicio proporciona 2-3 animales portadores de la construcción, pero no garantiza la transmisión a la descendencia ni la expresión del transgén. Se utiliza el fondo híbrido C57BL/6J o B6CBAF1. Otros antecedentes genéticos son posibles bajo petición.

Transgénesis aditiva

Modelos de sobreexpresión obtenidos por microinyección pronuclear de transgenes proporcionados por los usuarios solicitantes. El servicio proporciona 2-3 animales portadores de la construcción, pero no garantiza la transmisión a la descendencia ni la expresión del transgén. Se utiliza el fondo híbrido C57BL/6J o B6CBAF1. Otros antecedentes genéticos son posibles bajo petición.

Modelos KO y KI mediante mutagénesis dirigida basada en células ES

El servicio realiza la búsqueda de vectores y líneas ES disponibles en repositorios internacionales para los diferentes genes de ratón. En el caso de los vectores, puede realizar la electroporación en líneas ES disponibles para el servicio (G4 o R1). En el caso de las células, el servicio recibe las células, las expande y genotipa antes de inyectarlas en embriones de ratón en estadio de 8 células. El servicio proporciona 2-3 quimeras de alta contribución, aunque no garantiza la transmisión germinal.

Edición de genes (KO, KI y modelos condicionales)

En este tipo de modelos el soporte del servicio abarca desde el diseño de guías hasta la generación de los animales portadores de la modificación deseada. Los modelos KO se generan por electroporación, al igual que las mutaciones puntuales y las pequeñas inserciones. En el caso de inserciones más grandes o para la generación de animales condicionales, se utiliza la microinyección en fase de 1 célula. El servicio realiza la identificación de fundadores.

Generación de nuevas líneas de células madre embrionarias de ratón

Se obtienen a partir de embriones de líneas genéticamente alteradas proporcionados por el solicitante, mediante cultivo in vitro en condiciones que mantengan la pluripotencia. El servicio proporciona 1-2 viales de células congeladas una vez generadas y si se requiere, medio de cultivo específico.

Apoyo en la gestión de colonias de ratones GA

La realización de este servicio abarca desde la localización de líneas en los diferentes repositorios internacionales, hasta el diseño de cebadores para genotipado, PCR larga y secuenciación Sanger o esquemas de cruzamiento para la generación del genotipo deseado con el menor número posible de animales, asesorando también en los controles necesarios para los experimentos.

Formación

El servicio asesora sobre el proceso de obtención de autorización para la creación de líneas alteradas genéticamente. También organiza y participa en diferentes cursos relacionados con la gestión de modelos alterados genéticamente e imparte formación práctica sobre la obtención, el cultivo y la transferencia de embriones.

Personal

Verónica Domínguez Plaza

Lab.: CNB Servicio mixto con CBM. Ext.: 4401
vdominguez(at)cbm.csic.es