Electron microscopy
El Servicio de Microscopía Electrónica (SME) proporciona apoyo científico-técnico a los grupos de investigación interesados en emplear la microscopía electrónica para el análisis ultraestructural e inmunocitoquímico de complejos macromoleculares, virus, bacterias, células eucariotas y tejidos. Los métodos disponibles incluyen técnicas convencionales de procesamiento de muestras y criotécnicas como la criosustitución, la crioultramicrotomia y la criofractura.
Además el SME ofrece diferentes métodos de localización in situ de ácidos nucleicos y proteínas, incluyendo técnicas de microscopía correlativa óptica-electrónica (CLEM) para la observación in vivo de moléculas de interés y su posterior localización ultraestructural.
El SME dispone de dos microscopios electrónicos de transmisión, de 100 kV y 120kV, ambos equipados con cámaras fotográficas digitales (4K x 4K) de última generación y de un microscopio invertido de fluorescencia dedicado a técnicas CLEM. Además dispone del siguiente equipamiento para el procesamiento de muestras: equipo de criofijación por inmersión, equipo de criosustitución automática, ultramicrotomo convencional, crioultramicrotomo y unidad de criofractura.
| Last name | Name | Laboratory | Ext.* | |
|---|---|---|---|---|
| Guerra Rodríguez | Milagros | 113 | 4532 | mguerra(at)cbm.csic.es |
| Rejas Marco | Mª Teresa | 113 | 4538/4532 | mtrejas(at)cbm.csic.es |
| Rodríguez Gómez | María Josefa | 113 | 4532 | mj.rodriguez(at)cbm.csic.es |
Microscopio Electrónico de Transmisión JEM1010 (Jeol)
Características técnicas:
- Cañón de emisión termoiónica: filamento de tungsteno
- Voltaje de aceleración: hasta 100 KeV
- Lente objetivo: alto contraste (pieza polar SAP-10B)
- Resolución entre líneas: 0,2 nm
Cámara CMOS TemCam F416 (TVIPS)
Características técnicas:
- Sensor CMOS 4Kx4K (tamaño pixel 15,6 um2)
- Acoplamiento del centelleador al CMOS por fibra óptica 1:1
- Velocidad de captura: 1.0 fps a máxima resolución
- Resolución entre líneas: 0,2 nm
Microscopio Electrónico de Transmisión JEM1400 Flash (Jeol)
Características técnicas:
- Cañón de emisión termoiónica: admite filamento de tungsteno y de LaB6
- Voltaje de aceleración: hasta 120 keV
- Lente objetivo: pieza polar tipo STEM (EM-10151ST12)
- Resolución entre líneas: 0,2 nm
- Goniómetro motorizado en 5 ejes
- Portamuestras de alto ángulo de inclinación para uso en tomografía
Cámara CMOS Oneview (Gatan)
Características técnicas:
- Sensor CMOS 4K x 4K (tamaño pixel 15 um2)
- Acoplamiento del centelleador al CMOS por fibra óptica 1:1
- Velocidad de captura: 25 fps a máxima resolución
- Rango dinámico: 16Bit
Prestaciones del servicio:
- Supervisión científico-técnica en el diseño experimental, análisis e interpretación de datos
- Formación y supervisión de los usuarios en el manejo del microscopio electrónico
- Mantenimiento, ajuste y manejo de los equipos
- Tinción negativa de complejos macromoleculares
- Inclusión convencional de muestras biológicas en resinas y ultramicrotomía
- Criosustitución e inclusión a baja temperatura
- Crioultramicrotomía (técnica de Tokuyasu)
- Inmunomicroscopía electrónica con conjugados a oro coloidal
- Criofractura, criosecado y obtención de replicas de Pt-C
- Microscopía electrónica de ácidos nucléicos
- Microscopía correlativa óptica-electrónica
