Edición Genética de Ratón
El servicio de edición genética de ratón es un servicio compartido entre el CBMSO y el CNB que tiene como misión facilitar a los usuarios solicitantes los modelos de ratón genéticamente alterado que requieran para sus estudios. El servicio presta apoyo a usuarios internos y externos al CSIC para el diseño y generación de nuevos modelos animales por diferentes tecnologías y asesora en diferentes aspectos de la gestión de colonias. El servicio también diseña guías y edita líneas celulares mediante electroporación
Nosotros no dejamos equipos para los usuarios, sólo prestamos servicios
- Transgénesis aditiva
Modelos de sobreexpresión obtenidos por la microinyección pronuclear de transgenes proporcionados por los usuarios solicitantes. El servicio proporciona 2-3 animales portadores de la construcción, pero no garantiza la transmisión a la descendencia o la expresión del transgén. Se utilizan fondos C57BL/6J o fondo híbrido B6CBAF1. Otros fondos genéticos son posibles bajo demanda.
- Modelos KO y KI por mutagénesis dirigida basada en células ES
El servicio realiza la búsqueda de vectores y líneas ES disponibles en los repositorios internacionales para los diferentes genes de ratón. En caso de vectores, puede realizar una electroporación en líneas ES de las que dispone el servicio (G4 o R1). En caso de células el servicio recepciona las células, expande y genotipa antes de realizar la inyección de las mismas en embriones de ratón en fase de 8 células. El servicio proporciona 2-3 quimeras de alta contribución, aunque no garantiza transmisión a línea germinal
- Edición genética (modelos KO, KI y condicionales)
En este tipo de modelos el apoyo del servicio cubre desde el diseño de guías hasta la generación de los animales portadores de la modificación deseada. Los modelos KO se generan mediante electroporación, lo mismo que mutaciones puntuales y pequeñas inserciones. En caso de insertos de mayor tamaño o para la generación de animales condicionales, se recurre a la microinyección en fase de 1 célula. El servicio realiza la identificación de fundadores.
- Generación de nuevas líneas de células ES de ratón
Se obtienen a partir de embriones de líneas genéticamente alteradas que proporcione el solicitante, mediante el cultivo in vitro en condiciones que mantienen la pluripotencia. El servicio proporciona 1-2 viales de células congeladas una vez generadas y si se requiere, medio de cultivo específico
- Apoyo en la gestión de colonias de ratones GA
La actuación de este servicio cubre desde la localización de líneas en los diferentes repositorios internacionales, al diseño de primers para genotipación, long PCR y secuenciación Sanger o de esquemas de cruces para la generación del genotipo buscado con el menor numero de animales posible, asesorando también sobre los controles necesarios para los experimentos.
- Formación
El Servicio asesora sobre el proceso de obtención de la autorización para la creación de líneas genéticamente alteradas. También organiza y participa en diferentes cursos relacionados con la gestión de modelos genéticamente alterados y facilita entrenamiento práctico en la obtención, cultivo y transferencia de embriones.
Solicitudes:
- Rederivación de embriones
- Microinyección pronuclear de ADN (Transgénesis aditiva)
- Generación de ratones KO y KI, mediante células ES ó CRISPR
Para otras solicitudes, consultar directamente con el servicio.
